构建新城疫病毒NP、P和L基因的表达载体及NP在真核细胞中表达检测

作者：桂花

来源：内蒙古农业大学学报(自然科学版), 2013, (02): 96-99.

DOI：10.16853/j.cnki.1009-3575.2013.02.019

• 新城疫病毒
• NP
• P和L基因
• 表达质粒 Newcastle disease virus(NDV)
• NP
• P and L gene
• expression vector

本研究通过在vero细胞中增殖新城疫病毒、Trizol法提取病毒RNA,应用RT-PCR法扩增NP、P和L基因,再分别克隆到pGEM-T easy载体上,经限制性内切酶酶切鉴定、PCR检测和测序确认后,分别亚克隆在真核表达载体pcDNA3.1(+)上,分别命名为pcDNA3.1(+)-NP,pcDNA3.1(+)-P和pcDNA3.1(+)-L。重组质粒pcD-NA3.1(+)-NP单独转染BHK-21细胞。经Western blot检测,认定NP基因在BHK-21细胞中成功表达。新城疫病毒NP、P和L基因的成功克隆,为建立新城疫病毒反向遗传操作系统以及实验教学和研究奠定了基础。

• 单位
  呼伦贝尔学院