大丽轮枝菌效应蛋白VdSRP2的功能分析

作者：李彪; 王媛; 王春巧; 都业娟^*; 黄家风^*

来源：植物保护学报, 2023, 50(03): 744-756.

DOI：10.13802/j.cnki.zwbhxb.2023.2022024

• 大丽轮枝菌
• 效应蛋白
• VdSRP2基因
• 致病力
• 表达

为明确效应蛋白VdSRP2在大丽轮枝菌Verticillium dahliae中的生物学功能，从大丽轮枝菌落叶型菌株V592中克隆VdSRP2基因并进行生物信息学分析，利用酵母转化酶分泌系统对其信号肽活性进行测定，采用实时荧光定量PCR(real-time fluorescence quantitative PCR,qPCR)技术分析VdSRP2基因在大丽轮枝菌中的表达模式，并以V592菌株为材料获得VdSRP2基因的敲除突变体和过表达体菌株，通过表型分析和致病性测定确定VdSRP2基因的生物学功能。结果显示，VdSRP2基因编码232个氨基酸，含有5个半胱氨酸残基，N-端信号肽具有分泌活性，为真菌的典型效应蛋白；VdSRP2基因主要在大丽轮枝菌菌丝和微菌核中表达，其中经棉花根系诱导培养24 h时表达量最高；与野生型菌株V592相比，VdSRP2基因敲除导致大丽轮枝菌的产孢量和孢子萌发率显著下降，不能形成微菌核，对棉花的致病力明显减弱；但VdSRP2基因敲除不影响大丽轮枝菌的穿透能力；VdSRP2基因在本氏烟和棉花叶片瞬时表达不会诱导细胞死亡。表明VdSRP2是大丽轮枝菌微菌核形成必需的关键基因，并在大丽轮枝菌产孢、孢子萌发和致病力等方面起着重要作用，但VdSRP2蛋白不能作为激发子激活寄主抗性反应。

• 单位
  石河子大学