人结直肠癌组织miR-363表达对细胞增殖与迁移活性影响的观察

作者：严秀蕊; 王立斌; 陈冬梅; 李玉奎; 杨银学

来源：中华肿瘤防治杂志, 2014, 21(07): 509-513.

DOI：10.16073/j.cnki.cjcpt.2014.07.011

• 结直肠肿瘤
• 微RNAs
• 基因芯片
• 细胞增殖

目的:研究microRNA-363(miR-363)在结直肠癌组织中的表达对细胞增殖和迁移活性的影响,并探讨其临床意义。方法:收集2011-02-01-2011-12-31宁夏医科大学总医院经手术切除的结直肠癌标本22例及对应癌旁正常组织(距肿瘤边缘>5cm)。采用microRNA芯片技术筛选出在结直肠癌中低表达的miR-363;荧光定量PCR检测在3株恶性程度不同的结直肠癌细胞系LoVo、LS174T和SW480以及22例新鲜结直肠癌组织中miR-363的表达差异;构建miR-363慢病毒表达载体转染LoVo细胞,筛选出稳定表达miR-363及空载体的细胞株LoVo-363和LoVo-NC,荧光定量PCR检测转染后两细胞株中miR-363的表达;MTT法检测两细胞株的增殖情况;划痕实验检测两细胞株的迁移能力。结果:与正常结直肠细胞系CCD-18Co相比,miR-363在结直肠肿瘤细胞系LoVo、LS174T及SW480中表达均显著下调,在LoVo中表达水平为0.047±0.026,P<0.001;在LS174T中表达水平为0.42±0.045,P=0.013;在SW480中表达水平为0.058±0.017,P<0.001。miR-363的表达在不同性别(P=0.926)、不同年龄(P=0.785)间比较,差异均无统计学意义;而在不同病理分化程度(P=0.016)、TNM分期(P=0.018)及有无淋巴结转移(P=0.045)间比较,差异均有统计学意义。与LoVo-NC的1.00±0.131相比,LoVo-363中miR-363的表达5.32±0.329显著增高,P=0.001。MTT结果表明,第3天开始LoVo-363增殖能力显著低于LoVo-NC,第8天时差异达到最大,miR-363组为0.69±0.052,LoVo-363组为2.07±0.088,P=0.003。划痕实验表明,LoVo-363组细胞迁移能力为(35.26±12.09)%,显著低于LoVo-NC组的(51.89±10.11)%,P=0.023。结论:miR-363在结直肠癌中低表达,其能够抑制肿瘤细胞的增殖和迁移,可能与结直肠癌的发生、发展及转移密切相关。

• 单位
  宁夏医科大学总医院