miR-153靶向抑制活化蛋白C(APC)加重脂多糖诱导的脓毒症大鼠肺损伤及机制

作者：杨亚东; 彭金娥; 佘秋芳; 汤瑜; 汪江; 章金鹏; 刘兴; 蔡榕松; 周子尧; 曾爽; 许冀^*

来源：细胞与分子免疫学杂志, 2022, 38(10): 911-917.

DOI：10.13423/j.cnki.cjcmi.009445

• miR-153
• 活化蛋白C(APC)
• 脂多糖
• 脓毒症肺损伤

目的 探讨miR-153靶向活化蛋白C(APC)调控脂多糖(LPS)诱导的大鼠脓毒症肺损伤的机制。方法 雌性SD大鼠分为对照组、 LPS组、 LPS联合miR-153抑制物(miR-153 inhibitor)组、 LPS联合miR-153抑制物阴性对照(inhibitor NC)组、 LPS和miR-153 inhibitor联合APC小干扰RNA(si-APC)组、 LPS和miR-153 inhibitor联合APC小干扰RNA阴性对照(si-NC)组。除对照组外，其余各组通过给予相应处理后，再给予LPS诱导建立大鼠脓毒症损伤模型。通过实时定量PCR检测miR-153的表达，Western blot法检测APC、 B淋巴细胞瘤因子2(Bcl2)和裂解型胱天蛋白酶3(c-caspase-3)的蛋白表达；分离并培养大鼠肺泡上皮细胞，CCK-8法检测细胞活力；流式细胞术检测细胞凋亡。ELISA检测大鼠血清中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、白细胞介素6(IL-6)、 IL-1β和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达水平；双荧光素报告实验检测miR-153和APC的关系。结果 与对照组相比，脓毒症肺损伤大鼠模型中，miR-153表达明显增加，APC明显降低。LPS组的细胞活力、 Bcl2蛋白表达和SOD活性明显降低，细胞凋亡率、 c-caspase-3蛋白表达、 MDA、 IL-6、 IL-1β、 TNF-α含量显著增加；与LPS联合inhibitor NC组相比，LPS联合miR-153 inhibitor组的细胞活力、 Bcl2蛋白表达和SOD活性明显增加，细胞凋亡率、 c-caspase-3蛋白表达、 MDA、 IL-6、 IL-1β、 TNF-α表达显著降低。miR-153可以靶向调控APC的表达，与LPS和miR-153 inhibitor联合si-NC组相比，LPS和miR-153 inhibitor联合si-APC组的细胞活力、 Bcl2蛋白表达和SOD活性明显降低，细胞凋亡率、 c-caspase-3蛋白表达、 MDA、 IL-6、 IL-1β、 TNF-α表达显著增加。结论 LPS诱导肺组织miR-153表达增强，靶向抑制APC,促进脓毒症大鼠肺组织的细胞凋亡、氧化应激和炎症反应，加重损伤。

• 单位
  黄冈市中心医院; 蕲春县人民医院