基于NF-κB信号通路探究大黄酸对肺泡上皮细胞损伤的保护作用

作者：赵宁生^*; 胡勇; 郑玲

来源：浙江医学, 2023, 45(12): 1244-1346.

• 急性肺损伤
• 脂多糖
• 大黄酸
• 核因子-κB
• 增殖

目的 探讨大黄酸对脂多糖（LPS）诱导的炎症损伤人肺泡上皮细胞增殖、迁移及NF-κB信号通路的保护作用。方法 体外培养A549细胞分为对照组（不做干预）、模型组（以10μg/ml LPS刺激A549细胞24 h构建体外急性肺损伤细胞模型）、LPS+2、4、8μmol/L大黄酸组（在模型组的基础上加2、4、8μmol/L大黄酸），采用ELISA法及细胞计数试剂盒-8(CCK-8)测定细胞炎症因子水平和活力以筛选出大黄酸最适浓度（2μmol/L）。而后将细胞分为对照组（不做干预）、模型组（10μg/ml LPS刺激A549细胞24 h）、大黄酸组（在模型组的基础上加2μmol/L大黄酸进行干预）、BAY 11-7082组（在模型组的基础上加5μmol/L BAY 11-7082进行干预）、抑制剂组（大黄酸组的基础上加5μmol/L BAY 11-7082进行干预）和激活剂组[大黄酸组的基础上加1μmol/L佛波酯（PMA）进行干预]。24 h后，分别采用5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷（EdU）、Transwell小室及Western blot法测定各组细胞增殖率、迁移数及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)、细胞周期素D1(Cyclin D1)、NF-κB p65和磷酸化NF-κB p65(p-NF-κB p65)蛋白表达水平。结果 与模型组相比，LPS+不同浓度大黄酸组炎症因子IL-6、IL-1β水平均降低（均P<0.05），细胞活力均升高（均P<0.05）。与对照组相比，模型组细胞增殖率、Cyclin D1蛋白表达水平均降低（均P<0.05），细胞迁移数、Caspase-1、p-NF-κB p65蛋白表达水平均升高（均P<0.05）。与模型组相比，大黄酸组和BAY 11-7082组显著扭转了上述指标的变化（均P<0.05）。与大黄酸组相比，BAY 11-7082加强了、PMA则削弱了2μmol/L大黄酸的作用（均P<0.05）。结论 大黄酸对LPS诱导的炎症损伤A549细胞具有保护作用，并促进细胞增殖和抑制细胞迁移，其作用机制可能与抑制NF-κB信号通路有关。

• 单位
  广西中医药大学第一附属医院