痛泻要方对肝郁脾虚型UC大鼠结肠组织Claudin-1、ZO-1及血清COX-2、iNOS表达的影响

作者：樊俐慧; 朱向东; 杨霞; 王志刚^*

来源：中医药信息, 2023, 40(08): 15-22.

DOI：10.19656/j.cnki.1002-2406.20230803

• 痛泻要方
• 溃疡性结肠炎
• 密封蛋白1
• 紧密连接蛋白1
• 环氧合酶-2
• 诱导型一氧化氮合酶

目的：探讨痛泻要方对肝郁脾虚型溃疡性结肠炎（ulcerative colitis, UC）模型大鼠血清中环氧合酶-2(cyclooxygenase-2, COX-2)、诱导型一氧化氮合酶（induced nitric oxide synthase, iNOS）含量及结肠组织中密封蛋白1(Claudin-1)、紧密连接蛋白1(ZO-1)基因及蛋白表达的影响。方法：100只Wistar大鼠用病-证结合法复建肝郁脾虚型UC模型，按随机数字表法将造模组大鼠分为模型组（10 g/kg蒸馏水灌胃），美沙拉嗪组（0.4 g/kg美沙拉嗪灌胃），痛泻要方高、中、低剂量组（20.8、10.4、5.2 g/kg痛泻要方灌胃），每组20只。另取20只正常大鼠作为空白组（10 g/kg蒸馏水灌胃），各组灌胃体积均为10 mL/kg，连续21 d。药物治疗结束后，取血清及结肠组织，ELISA法检测血清中COX-2、iNOS含量；观察结肠组织大体形态及损伤情况，HE染色观察病理表现，RT-qPCR法检测Claudin-1、ZO-1 mRNA表达，免疫组化法和Western blot法检测Claudin-1、ZO-1平均光密度值及蛋白表达。结果：光镜观察显示，模型组大鼠结肠黏膜充血、水肿，炎性细胞浸润，细胞间紧密连接断裂；经痛泻要方干预后，大鼠结肠黏膜病理变化明显改善，细胞间紧密连接正常。与空白组比较，模型组大鼠血清中COX-2、iNOS含量明显升高（P <0.01）;Claudin-1、ZO-1 mRNA、平均光密度值和蛋白表达明显降低（P <0.01）。与模型组比较，美沙拉嗪组COX-2、iNOS含量降低（P <0.01）；痛泻要方高、中剂量组COX-2、iNOS含量显著降低（P <0.01），痛泻要方低剂量组COX-2、i NOS含量降低（P <0.05）；美沙拉嗪组及痛泻要方高、中剂量组Claudin-1、ZO-1 mRNA平均光密度值及蛋白表达量显著升高（P <0.01）；痛泻要方低剂量组Claudin-1、ZO-1 mRNA表达量与模型组比较，差异无统计学意义（P> 0.05）；痛泻要方低剂量组Claudin-1、ZO-1平均光密度值升高（P <0.05），蛋白表达升高（P <0.01,P <0.05）。结论：痛泻要方治疗肝郁脾虚型UC的作用可能与上调关键蛋白Claudin-1、ZO-1的表达量及降低炎症细胞因子COX-2、iNOS的含量有关。

• 单位
  甘肃中医药大学; 宁夏医科大学; 天水市中医医院