激活的富血小板血浆对卵巢储备功能降低患者卵丘颗粒细胞凋亡和增殖的影响

作者：朱文倩; 张慧敏; 李磊; 赵明子; 郝翠芳^*

来源：生殖医学杂志, 2022, 31(05): 652-660.

• 卵丘颗粒细胞
• 富血小板血浆
• 卵巢储备功能降低
• 增殖
• 凋亡

目的 探讨激活的富血小板血浆(PRP)对卵巢储备功能降低(DOR)患者卵丘颗粒细胞凋亡和增殖的影响。方法 收集2020年8月至2021年9月在青岛妇女儿童医院生殖医学中心行常规IVF/ICSI-ET治疗的82例DOR不孕症患者的卵丘颗粒细胞，将所获细胞均分为PRP组(使用激活的PRP+培养液培养)和对照组(仅使用培养液培养)。采用细胞增殖及毒性检测法(CCK-8法)测定不同浓度PRP时人卵巢颗粒细胞(KGN细胞)的生长曲线，并选择最适PRP浓度。使用Tunel法检测PRP组和对照组卵丘颗粒细胞的凋亡情况；通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测凋亡基因Bax、抗凋亡基因Bcl-2的表达，采用细胞免疫荧光染色法检测凋亡蛋白Bax、抗凋亡蛋白Bcl-2及增殖因子Ki-67的表达；同时，使用罗氏全自动发光仪检测两组卵丘颗粒细胞培养基上清液中雌二醇(E2)浓度，并对上述结果进行统计分析。结果 不同浓度PRP均可促进KGN细胞增殖，和10%胎牛血清联合使用时最适的PRP浓度为1%。PRP组卵丘颗粒细胞凋亡率显著低于对照组(P<0.001),凋亡因子Bax的mRNA和蛋白表达水平均较对照组显著降低(P<0.001),抗凋亡因子Bcl-2的mRNA和蛋白表达水平均较对照组显著升高(P<0.01),增殖因子Ki-67的蛋白表达亦显著高于对照组(P<0.001)。PRP组卵丘颗粒细胞培养基上清液中E2浓度显著高于对照组(P<0.001)。结论 体外培养人卵丘颗粒细胞时，给予激活的PRP能有效抑制颗粒细胞凋亡、促进其增殖，同时增强其分泌功能。

• 单位
  青岛大学; 滨州医学院