摘要
目的 研究微小RNA-146a(miR-146a)是否通过调控c-Jun氨基末端激酶(JNK)信号通路影响高氧下肺泡上皮细胞的氧化应激和细胞凋亡。方法 将肺泡上皮细胞分为Con组(对照),Model组(模型),Model+miR-NC组(转染miR-NC+高氧),Model+miR-146a组(转染miR-146a mimic+高氧),Model+miR-146a+Anisomycin组(转染miR-146a mimic++JNK信号通路激活剂Anisomycin+高氧)。试剂盒检测超氧化物歧化酶(SOD)、锰(Mn)SOD活性和丙二醛(MDA)含量,膜联蛋白(Annexin V)V-FITC/碘化丙啶(PI)双重染色法评估细胞凋亡,蛋白质印迹法(Western blot)分析活化的(Cleaved)-天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3(caspase3)、pro-caspase3、磷酸化JNK(p-JNK)表达,逆转录定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测miR-146a表达。结果 与Con组相比,Model组肺泡上皮细胞中SOD、MnSOD活性、pro-caspase3蛋白、miR-146a的表达水平降低,MDA含量、凋亡率、Cleaved-caspase3、p-JNK蛋白表达水平升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与Model组或Model+miR-NC组相比,Model+miR-146a组肺泡上皮细胞中SOD、MnSOD活性、pro-caspase3蛋白、miR-146a表达水平升高,MDA含量、凋亡率、Cleaved-caspase3、p-JNK蛋白表达水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与Model+miR-146a组相比,Model+miR-146a+Anisomycin组肺泡上皮细胞的SOD、MnSOD活性、pro-caspase3蛋白表达水平降低,MDA含量、凋亡率、Cleaved-caspase3蛋白表达水平升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 miR-146a通过激活JNK信号通路,减轻高氧下肺泡上皮细胞的氧化应激,并抑制细胞的凋亡。
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单位青岛市胶州中心医院