fmnl2基因沉默抑制SW620体外侵袭能力的机制

作者：朱曦龄; 黎功; 李黛

来源：检验医学与临床, 2017, 14(22): 3279-3286.

• 大肠癌
• fmnl2基因
• DRFs家族
• 侵袭
• Rho蛋白

目的研究fmnl2基因沉默抑制SW620体外侵袭能力的机制。方法筛选并建立fmnl2基因沉默的SW620细胞;反转录(RT)-聚合酶链反应(PCR)和蛋白质印迹(Western blot)检测干扰效率;Boyden试验检测fmnl2基因对SW620侵袭能力的影响。利用Active Rho pull-down试验和Western blot检测fmnl2基因沉默后,细胞中RhoA、RhoB、RhoC活性和蛋白水平的变化;利用Western blot检测RhoA/Rock信号转导通路中3种效应蛋白[Phospho-肌球蛋白轻链(MLC)、Phospho-LIM激酶(LIMK)、Phospho-Cofilin]及细胞内肌动蛋白纤维(F-actin)、核内MAL的蛋白变化。检测fmnl2基因沉默前后,磷脂酸(LPA)对细胞体外侵袭能力、RhoA的活性和蛋白水平、Phospho-MLC及MLC的影响。结果 fmnl2基因沉默后明显抑制SW620体外侵袭能力。fmnl2表达沉默后,细胞中RhoA活性降低,但蛋白水平没有明显变化;细胞中Phospho-Cofilin、Phospho-LIMK、Phospho-MLC、F-actin和核内MAL的蛋白水平均减少。fmnl2表达沉默后,LPA对细胞体外侵袭能力,RhoA活性及Phospho-MLC均无影响。结论 fmnl2表达沉默后,通过抑制RhoA/Rock信号转导通路,会影响肿瘤细胞的侵袭运动能力。

• 单位
  中国人民武装警察部队总医院