摘要
目的 采用富血小板血浆裂解液(platelet-rich plasma lysate, PL)复合透明质酸制备微针,通过优化制备工艺及评价血小板生长因子活性,探讨PL微针在治疗伤口愈合领域的应用前景。方法 首先使用透明质酸(hyaluronic acid, HA)作为针体基质材料,通过考察HA溶液流动性、针体形貌、压变性能及穿刺性能等,初步确定HA的浓度。再结合HA在PL中的溶解情况、PL微针的机械性能、皮肤穿刺等结果,优化富血小板血浆裂解液微针(PLMN)的制备工艺。考察PL微针的生长因子活性,并评价PL微针应用于大鼠伤口愈合的效果。结果 当HA质量浓度为30 mg/mL时,溶液具有良好的流动性,制备所得HA微针可刺穿3层封口膜,穿刺率达70%,具有较好的机械性能。HA在4℃溶解于PL中浓度为30 mg/mL时,溶液无结晶,流动性好,所制备的PL微针在高清显微镜和扫描电镜下显示针型良好,无弯折。体外透皮模拟实验结果显示,PL微针能够穿透4层封口膜,前3层穿刺率达85%以上。体内溶解实验显示,PL微针插入体内在10 min之内能够完全溶解;在40 min后微针插入体内后留下的微孔几乎闭合,无红肿红斑等不良反应。体内外透皮实验显示,PL微针穿透皮肤染色后可见清晰蓝色孔洞,说明微针能刺破皮肤屏障。生长因子检测结果显示,血小板裂解液的血小板衍生生长因子(PDGF-BB)含量为(17.67±1.23)ng/mL,转化生长因子(TGFβ1)的含量为(105.95±2.16)ng/mL,而PL微针制备并室温保存1周后,微针的PDGF-BB含量为(15.48±2.12)ng/mL,TGFβ1的含量为(56.26±1.53)ng/mL,与PL相比虽然有所下降,但仍较好地保持了生长因子活性。大鼠伤口愈合实验结果显示,d3 PL微针组的伤口愈合率与对照组相比有差异,分别是52.51±6.15(%)、33.31±3.60(%)(P<0.05)。结论 本实验所制备的富血小板血浆裂解液微针具有良好的机械性能,能够成功地刺穿皮肤角质层,并能较好的保持生长因子活性,对大鼠伤口愈合有较好的效果,为组织修复领域在微创治疗方面提供一种新的思路。
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单位中国医学科学院北京协和医学院