摘要
根据GenBank上已发表的马疱疹病毒1型(EHV-1)和马疱疹病毒4型(EHV-4)gD基因序列,设计一对特异性引物。将扩增的EHV-1gD基因片段克隆至pET-30a表达载体,筛选获得重组质粒pET-30a-gD。经鉴定证明pET-30a-gD原核载体构建成功。将其转化入BL-21大肠杆菌中用IPTG进行诱导表达,并对培养时间、IPTG诱导浓度等培养条件进行优化,收集菌液进行SDS-PAGE检测,结果显示pET-30a-gD获得了高效融合表达,其表达的蛋白分子量约为29kD。Western blot分析结果表明,显示获得的融合蛋白与EHV-1/EHV-4阳性血清发生特异性反应,具有良好的免...
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