熊果苷调控TLR4的表达影响多发性骨髓瘤细胞RPMI-8226增殖、细胞周期和凋亡的实验研究

作者：陶健; 王铃; 张李玉; 顾喆赟; 周晓丹; 张冬梅^*

来源：中国细胞生物学学报, 2023, 45(06): 873-880.

• 多发性骨髓瘤
• 熊果苷
• TLR4
• JAK2/STAT3信号通路
• 增殖
• 周期
• 凋亡

该次实验的目的是研究熊果苷是否通过调控Toll样受体4(TLR4)/JAK2/信号转导与转录因子3(STAT3)信号通路的激活从而影响多发性骨髓瘤细胞RPMI-8226增殖、细胞周期和凋亡。将RPMI-8226细胞分为对照NC组,低、中、高剂量组(50、100和200μg/mL熊果苷), si-NC组(转染si-NC),si-TLR4组(转染si-TLR4), pcDNA-NC+高剂量组(转染pc DNA-NC和200μg/mL熊果苷), pcDNA-TLR4+高剂量组(转染pc DNA-TLR4和200μg/mL熊果苷)。采用噻唑蓝溴化四唑(MTT)法检测细胞增殖。流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡变化情况。Western blot检测细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved-caspase-3)、TLR4、p-JAK2、p-STAT3蛋白的表达情况。q RT-PCR检测TLR4 mRNA表达水平。与NC组比较, 50、100和200μg/mL熊果苷逐渐降低RPMI-8226细胞的Cyclin D1蛋白表达水平、增殖活性、S期细胞比例、TLR4 mRNA和TLR4蛋白表达水平,并逐渐提高G0/G1期细胞比例、Cleaved-caspase-3蛋白表达水平和凋亡率(均P<0.05),且熊果苷的作用效果随剂量的增加呈现增强趋势;并且200μg/mL熊果苷降低RPMI-8226细胞的p-JAK2、p-STAT3蛋白表达水平(P<0.05)。si-TLR4组RPMI-8226细胞的Cyclin D1蛋白表达水平、增殖活性、S期细胞比例比si-NC组低, G0/G1期细胞比例、Cleaved-caspase-3蛋白表达水平和凋亡率比si-NC组高(P<0.05)。pc DNATLR4可以逆转熊果苷对多发性骨髓瘤细胞RPMI-8226增殖、细胞周期、凋亡和p-JAK2、p-STAT3蛋白表达的影响。综上,熊果苷通过下调TLR4/JAK2/STAT3信号通路水平,抑制多发性骨髓瘤细胞RPMI-8226增殖、阻滞细胞周期和促进细胞凋亡。

• 单位
  南通大学