CTLA4.FasL双功能融合基因真核表达载体的构建与表达

作者：万真; 吕毅; 严小鹏; 张晓刚

来源：细胞与分子免疫学杂志, 2012, (02): 167-169.

DOI：10.13423/j.cnki.cjcmi.006284

• 肝干细胞移植
• 基因治疗
• 融合蛋白

目的:构建携带CTLA4.FasL双功能融合基因的真核表达质粒,并在HEK293细胞中表达。方法:PCR扩增得到CTLA4和FasL胞外区编码序列,后用重叠PCR的方法将该两段序列融合,且在两者间插入接头序列(编码一柔性短肽GGSGG),所得的基因片段命名为CTLA4.FasL。XhoⅠ/KpnⅠ双酶切后,定向克隆至质粒pcDNA3.1(-),构建成真核表达载体pcDNA3.1(-)-CTLA4.FasL。转染入HEK293细胞,RT-PCR和Western blot验证融合基因的表达。结果:重叠PCR扩增获得CTLA4.FasL融合基因。真核表达载体pcD-NA3.1(-)-CTLA4.Fa...

• 单位
  西安交通大学第一附属医院