ATF6/CHOP信号通路对减毒牛结核分枝杆菌感染的THP-1细胞焦亡的调控作用

作者：马伯利; 刘悦阳; 聂雪伊; 李梦媛; 杨易; 徐金瑞^*

来源：中国病理生理杂志, 2022, 38(12): 2183-2190.

• THP-1细胞
• 卡介苗
• ATF6/CHOP信号通路
• 细胞焦亡

目的：探讨转录激活因子6(ATF6)/CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白（CHOP）信号通路对牛分枝杆菌减毒株（卡介苗，BCG）感染的THP-1细胞焦亡的调控作用。方法：在感染复数为10∶1的BCG感染THP-1细胞2、6、12、24和48 h基础上，设置si-NC组、si-NC+BCG组、si-ATF6+BCG组及si-CHOP+BCG组。si-NC组转染干扰阴性对照24 h后正常培养；si-NC+BCG组先转染阴性对照24 h后以感染复数为10∶1的BCG感染24 h;si-ATF6+BCG组和si-CHOP+BCG组分别转染si-ATF6和si-CHOP 24 h后再用感染复数为10∶1的BCG感染24 h。采用Western blot检测cleaved ATF6、CHOP、核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)、pro-caspase-1、caspase-1 p20、含caspase募集结构域的凋亡相关斑点样蛋白（ASC）、IL-1β p17、IL-18 p22及消皮素D-N端片段（GSDMD-N）蛋白表达；采用免疫荧光检测GSDMD蛋白表达；采用CCK-8法检测细胞活力。结果：Western blot结果显示，BCG感染THP-1细胞后，cleaved ATF6和CHOP蛋白的表达随感染时间延长逐渐升高，48 h达到最高，而GSDMD-N蛋白在24 h表达最高（P<0.01）。与si-NC组相比，si-NC+BCG组的cleaved ATF6、CHOP、NLRP3、pro-caspase-1、caspase-1 p20、ASC、IL-1β p17、IL-18 p22及GSDMD-N蛋白表达显著上调（P<0.01），细胞内GSDMD含量显著增加（P<0.01），细胞活力显著下降（P<0.01）；与si-NC+BCG组相比，si-ATF6+BCG组上述蛋白表达显著下调（P<0.01），细胞内GSDMD含量显著下降（P<0.01），细胞活力显著上升（P<0.01）；与si-NC+BCG组相比，si-CHOP+BCG组上述蛋白表达显著下调（P<0.01），细胞内GSDMD含量显著下降（P<0.01），细胞活力显著上升（P<0.01）。结论：ATF6/CHOP信号通路对BCG感染的THP-1细胞焦亡具有调控作用。

• 单位
  宁夏大学