摘要
目的设计并合成奥曲肽(OCT)偶联的壳聚糖(CS)分子信标(MB)纳米(CS-MB-OCT),研究CS-MB-OCT作为miR-155 MB载体识别miR-155并更好地成像肺癌细胞。方法免疫荧光检测肺癌细胞生长抑素受体2(SSTR2)的表达,以戊二醛为交联剂共价连接CS和OCT中的氨基并合成CS-MB-OCT,检测其吸收光谱、粒径等理化性质。激光共聚焦检测CS-MB-OCT作为miR-155 MB载体对肺癌细胞中miR-155的识别功能并成像肺癌细胞;采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)进行验证,并通过荧光信号强度比较CS-MB及CS-MB-OCT的成像功能差别。结果免疫荧光检测发现,SSTR2在肺癌细胞中表达,可和OCT特异性结合。按质量比为4:7合成的CS-MB-OCT,其连接率高,平均纳米粒径(83.41±0.95)nm,粒径范围40-140 nm,适合基因转染。荧光成像表明,OCT偶联的CS-MB-OCT能和肿瘤细胞表面的SSTR2特异性结合,促使更多的MB对肺癌细胞中miR-155识别并成像肺癌细胞,和非偶联OCT的CS-MB组相比,孵育时间更短(仅需1 h),荧光信号更强(P<0.05),荧光信号强弱趋势与实时qRT-PCR检测的miR-155表达趋势较一致。结论合成的CS-MB-OCT纳米能和SSTR2特异性结合,更好地对miR-155进行识别并成像肺癌细胞,为肺癌的早期诊断提供了新方法。
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单位贵州省人民医院; 中国人民解放军陆军军医大学; 新桥医院