转录延伸样因子7对低分化人胃癌细胞株BGC823侵袭、迁移能力的影响及机制

作者：梁巍; 耿玮; 范亚男; 叶智斌; 高明; 张立晓

来源：中华实验外科杂志, 2018, 35(04).

• 胃肿瘤
• 转录延伸样因子7
• 侵袭
• 迁移
• 基因克隆

目的探讨转录延伸样因子7(TCEAL7)对低分化人胃癌细胞株BGC823侵袭、迁移的影响及其机制。方法应用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)和Western blot法检测TCELA7 mRNA和蛋白在BGC823和正常胃黏膜细胞株GES-1中的表达;构建TCEAL7真核表达载体GFP-TCEAL7并转染BGC823细胞48 h,检测转染效果;噻唑蓝(MTT)法检测GFP-TCEAL7转染对BGC823细胞活性的影响;划痕实验、Transwell小室实验检测细胞侵袭、迁移;应用Real-time PCR和Western blot法检测转染GFP-TCEAL7转染对BGC823细胞侵袭、迁移基因表达水平的影响。结果 Real-time PCR和Western blot法显示,BGC823的TCEAL7表达(mRNA:0.280±0.048,蛋白:0.181±0.038)明显低于GES-1(mRNA:0.474±0.062,蛋白:0.346±0.057;t=-6.061,P=0.000;t=-5.900,P=0.000)。GFP-TCEAL7转染后胃癌BGC823细胞TCEAL7的mRNA及蛋白表达(1.886±0.326、1.007±0.262)比对照组(0.302±0.053、0.172±0.030)显著上调(t=11.748,P=0.000;t=7.756,P=0.000)。MTT结果显示,转染了GFP-TCEAL7的BGC823细胞活性(0.672±0.083)比对照组(1.242±0.215)显著减弱(t=-6.058,P=0.000)。划痕实验、Transwell小室实验显示转染了GFP-TCEAL7的BGC823细胞迁移能力[转染组(53.945±9.952)%,对照组(81.017±7.208)%]和侵袭能力(转染组76.333±12.420,对照组121.167±11.771)均明显降低(t=-5.396,P=0.00;t=-6.418,P=0.000)。Real-time PCR和Western blot法显示转染GFP-TCEAL7的BGC823细胞基质金属蛋白酶(MMP)-7、MMP-9的mRNA和蛋白表达水平下降,组织基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP1)和E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达明显增高。结论过表达TCEAL7可抑制BGC823细胞的侵袭、迁移。

• 单位
  河北省人民医院