DNA修复基因Rad51表达调控区结构分析

作者：袁瑛; 叶俊; 董琦; 郑树

来源：中华医学遗传学杂志, 2004, 21(03): 60-63.

DOI：10.3760/j.issn:1003-9406.2004.03.014

• Rad51基因
• 5′端非编码区
• 启动子
• 荧光素酶活性

目的　研究 DNA修复基因 Rad5 1的转录起始区上游序列 ,寻找与其表达有关的调控序列。方法　将待测片段分别克隆入 p GL3报告基因载体 ,用磷酸钙共沉淀法转染 U2 - OS细胞株后测定其荧光素酶活性。结果　转染了含片段 - 96 4～ +14 30和片段 - 733～ +14 30质粒的细胞有较高的荧光素酶活性 ,进一步缩短这两个片段 ,发现转染了含有 - 96 4～ - 4 12、- 74 6～ - 4 12、- 6 5 1～ - 4 12和 - 5 36～ - 4 12片段质粒的细胞均有荧光素酶活性 ,活性大小依次为 - 96 4～ - 4 12、- 6 5 1～ - 4 12、- 74 6～ - 4 12和 - 5 36～ - 4 12。结论　Rad5 1基因的启动子序列可能位于 - 5 36～ - 4 12之间 ,而在序列 - 6 5 1～ - 5 36和 - 96 4～- 74 6之间可能存在着增强子或正转录调节因子的结合位点 ,在 - 74 6～ - 6 5 1之间存在有抑制子或负转录调节因子的结合位点

• 单位
  浙江大学医学院附属邵逸夫医院; 浙江大学医学院附属第二医院