生存素通过线粒体途径影响K5诱导的血管内皮细胞凋亡

作者：胡青峰; 赵宏磊; 白涛; 薛金熔; 刘永民; 孙立忠^*

来源：中国循证心血管医学杂志, 2019, 11(11): 1311-1314.

DOI：10.3969/j.issn.1674-4055.2019.11.08

• 生存素
• 线粒体途径
• 血管内皮细胞
• Kringle 5

目的探讨生存素(Survivin)在人纤溶酶原K5诱导血管内皮细胞凋亡中的作用。方法分离培养脐带血管内皮细胞,用K5诱导处理,应用qRT-PCR和Western blot测定细胞中生存素表达。在细胞中转染生存素过表达载体,同时用K5处理细胞,流式细胞术测定细胞凋亡情况,JC-1法测定细胞线粒体膜电位,比色法测定细胞中三磷酸腺苷(ATP)的合成水平和细胞中Caspase-3、Caspase-9的活性,用H2DCFDA法测定细胞中活性氧(ROS)水平,Western blot测定细胞色素C(Cyt C)在线粒体和胞质中的水平。结果 K5诱导处理后,血管内皮细胞中生存素的转录和表达水平均降低,而转染生存素过表达载体后的细胞中生存素表达水平升高。生存素过表达的血管内皮细胞经K5诱导处理以后,细胞凋亡率降低,细胞线粒体膜电位升高,细胞合成的ATP增加,Caspase-3、Caspase-9活性降低,细胞中ROS水平减少,线粒体中Cyt C水平升高,而胞质中Cyt C水平降低,与只经过K5处理的细胞相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 K5可诱导血管内皮细胞中生存素表达下调,而上调生存素表达可抑制K5诱导的内皮细胞凋亡。

• 单位
  首都医科大学附属北京安贞医院