Paenibacillus massiliensis T7固氮基因簇nifBHDKENX的克隆、序列分析及铵和氧对nifB启动子的调控

作者：赵洪新; 刘旭明; 谢宝恩; 陈三凤

来源：中国科学C辑:生命科学 , 2005, (05): 43-51.

• nifBHDKENX
• 反向 PCR
• 启动子
• Paenibacillus massiliensis
• T7

Paenibacillus massiliensisT7是我室从北京郊区分离的一株革兰氏阳性、产芽孢的固氮菌.根据GenBank中已发表的多种固氮生物nifH基因序列,在其保守区域设计一对简并引物,PCR扩增获得324bp的nifH片段.用地高辛标记该片段为探针,对EcoRⅠ和PstⅠ消化的P.massiliensisT7染色体DNA进行Southern杂交,结果DNA/EcoRⅠ杂交道1.1kb和9kb处,DNA/PstⅠ杂交道1.3kb和8kb处分别有两条杂交带,从而初步判断nifH可能有两个拷贝.在324bpnifH片段的基础上,采用反向PCR扩增的方法,获得了purD和nifBHDKE...