摘要
肉碱棕榈酰转移酶(carnitine palmitoyltransferas,CPT)是调节脊椎动物长链脂肪酸β-氧化的关键因子,包括肉碱棕榈酰转移酶1(carnitine palmitoyltransferas 1,CPT1)和肉碱棕榈酰转移酶2(carnitine palmitoyltransferas 2,CPT2)两类,在能量代谢中起着重要调控作用。到目前为止,许多研究已经提供了在硬骨鱼中存在多种CPT基因的证据,但是在黄鳝(Monopterus albus)中关于CPT基因的研究还未见报道。本研究以黄鳝肝脏cDNA为模板,采用巢式PCR的方法和TA克隆技术获得CPT1A、CPT1B和CPT2三个基因的ORF序列,利用生物信息软件分析三者结构特征,并通过实时荧光定量PCR检测它们在不同组织间的表达情况。结果显示CPT1A、CPT1B和CPT2基因的ORF序列长度分别为2 367 bp、2 361 bp和2 004 bp,分别编码788、786和667个氨基酸;预测蛋白质成熟肽的分子量分别为89.83 kDa、89.70 kDa和74.55 kDa;三者二级结构主要由α-螺旋构成。同源性分析发现黄鳝CPT1A蛋白、CPT1B蛋白和CPT2蛋白与各物种间同源性较高,均大于60%;系统进化树显示黄鳝CPT1A、CPT1B和CPT2蛋白均与硬骨鱼棘鳍总目的亲缘关系较近。组织分布分析表明,黄鳝CPT1A 和CPT1B在心脏中的表达量最高,CPT2在胃中表达量最高,并且三者基因集中在心脏、胃、肌肉、下丘脑和性腺等组织中。通过对黄鳝CPT1A、CPT1B和CPT2基因表达分布研究可以推断它们可能在黄鳝营养代谢和性腺发育方面发挥作用。
- 单位