摘要

Tudor-SN (Tudor staphylococcal nuclease-like domains, TSN)蛋白参与基因表达和转录后基因沉默,在植物抗病过程中发挥重要作用,但其在西瓜抗枯萎病中作用尚不清楚。西瓜蛋白ClTSN与尖孢镰刀菌无毒因子FonSIX6互作,为明确ClTSN在抗枯萎病中的作用,本研究对ClTSN基因结构和蛋白结构特征进行了分析,还通过ClTSN注射烟草瞬时表达对其进行亚细胞定位分析,结果表明CLTSN定位在细胞核中。利用荧光定量PCR (qRT-PCR)对西瓜ClTSN基因的时空表达模式进行了分析,发现在多个植物组织中该基因在雄花中表达量较大。采用病毒诱导的基因沉默(Virus-induced gene silencing, VIGS)技术对西瓜ClTSN基因进行了干涉抑制,对VIGS干涉植株接种尖孢镰刀杆菌(Fusarium oxysporum f.sp.niveum, Fon)生理小种1以了解ClTSN基因在抗枯萎病中的作用,结果表明ClTSN基因被干涉后与对照相比,植株对枯萎病抗性降低。同时还分析了ClTSN 基因被抑制后其对植株抗氧化系统超氧阴离子自由基的水平和光合作用系统损伤的影响,结果表明,抑制ClTSN基因的表达,促进了西瓜中超氧化物歧化酶(POD)的积累,引发光合作用系统II (PSII)损伤加重,以上数据表明ClTSN基因在西瓜抗枯萎病生理小种1调控中具有重要作用。本研究为解析西瓜抗病机理、遗传育种提供一定的参考。