阳离子-氯离子共转运体KCC2、NKCC1在对氯苯丙氨酸致急性失眠大鼠模型脑干中的表达

作者：蔺芳菊; 杨晓苏; 杨德; 邹艳群

来源：中华医学杂志, 2013, (19): 1507-1511.

• 入睡和睡眠障碍
• 阳离子-氯离子共转运体
• KCC2
• NKCC1

目的探讨阳离子-氯离子共转运体KCC2、NKCC1在大鼠急性失眠发生机制中的作用。方法 SD大鼠腹腔注射对氯苯丙氨酸(PCPA)制作急性失眠大鼠模型,同步设立生理盐水对照组和地西泮干预组,每组6只;用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、免疫印迹(Western blot)检测各组大鼠脑干KCC2、NKCC1的表达;用氯离子荧光探针(MQAE),结合激光共聚焦显微镜观察脑干组织细胞内氯离子浓度([Cl~-]i)。结果 (1)模型组和干预组的KCC2 mRNA及蛋白表达均低于对照组(mRNA丰度值:0.196±0.021比0.939±0.109,P<0.05;0.485±0.026比0.939±0.109,P<0.05;蛋白相对值:0.363±0.058比0.967±0.155,P<0.05;0.663±0.106比0.967±0.155,P<0.05);干预组高于模型组(mRNA丰度值:0.485±0.026比0.196±0.021,P<0.05;蛋白相对值:0.663±0.106比0.363±0.058,P<0.05)。(2)模型组的NKCC1 mRNA及蛋白表达稍高于对照组,但差异无统计学意义(mRNA丰度值:0.344±0.026比0.320±0.019,P>0.05;蛋白相对值:0.244±0.010比0.230±0.021,P>0.05);干预组较对照组和模型组降低(mRNA丰度值:0.066±0.031比0.320±0.019,P<0.05;0.066±0.031比0.344±0.026,P<0.05;蛋白相对值:0.131±0.012比0.230±0.021,P<0.05;0.131±0.012比0.244±0.010,P<0.05)。(3)模型组的[Cl~-]i高于对照组和干预组(相对值:0.0315±0.0039比0.0164±0.0019,P<0.05;0.0315±0.0039比0.0182±0.0013,P<0.05);干预组稍高于对照组,但差异无统计学意义(相对值:0.0182±0.0013比0.0164±0.0019,P>0.05)。结论 (1)脑干KCC2表达下调及[Cl~-]i的升高可能参与大鼠急性失眠的病理机制;(2)地西泮可能通过上调KCC2和下调NKCC1的表达,进而降低[Cl~-]i而发挥镇静催眠作用。

• 单位
  神经内科; 中南大学湘雅医院