杆状病毒和分批补料发酵联用高效表达单纯疱疹病毒Ⅱ型糖蛋白D

作者：刘涛; 董惠钧; 黄志成; 郑伟; 祝水芬

来源：中国预防医学杂志, 2011, (08): 653-657.

DOI：10.16506/j.1009-6639.2011.08.017

• 昆虫杆状病毒表达系统
• 单纯疱疹病毒Ⅱ型
• 糖蛋白D
• 分批补料发酵 Baculovirus expression system
• Herpes simplex virus type 2
• Glycoprotein D
• Fed batch culture

目的利用Bac-to-Bac表达系统和分批补料式培养技术在草地夜蛾昆虫细胞(Sf9)中高效表达重组单纯疱疹病毒Ⅱ型糖蛋白D(HSV-2 gD2)。方法 以HSV-2基因组DNA为模板克隆全长gD2基因,利用Bac-to-Bac表达系统构建含目的基因的重组杆状病毒。同时采用分批补料式培养技术高密度培养Sf9细胞实现重组gD2蛋白的高效表达。构建豚鼠生殖器疱疹模型,研究重组HSV-2 gD2蛋白的免疫活性。结果在一个5 L生物反应器内,在15 mmol/L葡萄糖、0.4 g/L谷氨酰胺以及45%溶解氧的培养条件下,重组gD2蛋白的产量高达192 mg/L。此外,纯化后的重组gD2免疫能显著降低豚...

• 单位
  杭州市疾病预防控制中心; 鲁南制药集团股份有限公司