Myosin-Vc特异性片段的原核表达及其抗血清的制备

作者：陈宗涛; 刘丽梅; 徐小峰; 田衍平; 张俊磊; 王嘉丽; 安静

来源：第三军医大学学报, 2008, (07): 600-602.

DOI：10.3321/j.issn:1000-5404.2008.07.014

• Myosin-Vc
• 原核表达
• 多克隆抗体

目的原核表达Myosin-Vc(Myo5c)蛋白并纯化,制备小鼠、家兔多克隆抗体,为探索Myo5c在病毒感染中的作用提供研究工具。方法采用RT-PCR方法从人胃粘膜组织中克隆编码Myo5c特异性蛋白的基因片段,构建该片段与6×His标签的融合蛋白表达质粒pQE-31/Myo5c,原核表达与蛋白纯化后,分别免疫BALB/c小鼠和新西兰兔,制备Myo5c抗血清。采用ELISA检测抗体效价,Westernblot和间接免疫荧光染色检验抗体特异性。结果获得Myo5c特异性片段约42×103的纯化蛋白。ELISA检测小鼠和家兔抗血清效价分别为1∶12800、1∶6400。Westernblot和间接免疫荧光染色显示所制备的抗体能特异性识别Myo5c。结论获得Myo5c特异性蛋白,并成功地制备了Myo5c特异性的小鼠和家兔抗血清。

• 单位
  第三军医大学; 第三军医大学西南医院; 基础医学院; 首都医科大学