脐血CD34~+细胞向巨核细胞的分化扩增及基因的表达变化

作者：王海莲; 鞠秀丽; 葛伟; 李栋; 沈柏均

来源：山东大学学报(医学版), 2009, (11): 95-99.

• 脐血
• CD34 细胞
• 巨核细胞
• 扩增

目的研究脐血CD34+细胞向巨核细胞的诱导分化及体外扩增,并观察此过程中巨核细胞特异性基因表达的变化。方法免疫磁珠法分离获得CD34+细胞培养在无血清无基质培养基中,采用TPO+SCF+IL-3+IL-6、TPO+SCF+IL-3、TPO+SCF三种不同因子组合对其诱导分化及扩增。收集3、7、10、14 d的扩增产物,运用荧光显微镜检测巨核细胞的表面标志;流式细胞术(FCM)检测巨核细胞的凋亡;对巨核细胞进行DNA含量检测以及荧光定量PCR检测特异性基因表达的变化。结果分离获得的CD34+细胞在体外可以有效扩增,随培养时间的延长,CD34+/CD41+细胞数第7天达最高值,之后逐渐下降;而CD41+、CD42b+、CD61+细胞随培养时间的延长表达量逐渐增高。DNA含量检测发现,随着培养天数的增加,多倍体细胞所占的百分比增加。三种因子组合中TPO+SCF+IL-3+IL-6组扩增效率最高。荧光定量PCR显示转录因子GATA-1、NF-E2、TXS、GPIIb和HPRT在第7天表达量最高,之后下降。凋亡转录因子APAF-1随培养天数的延长表达量增加。结论脐血CD34+细胞在体外可向巨核细胞诱导分化及扩增,其基因...

• 单位
  山东大学齐鲁医院; 山东大学第二医院