KPC1对肝癌细胞增殖和迁移能力的影响

作者：周光明; 金亮; 高成明; 曹鹏博; 周钢桥^*

来源：军事医学, 2018, 42(04): 254-260.

• 肝肿瘤
• KPC1
• 细胞增殖
• 细胞迁移
• 细胞运动
• RNA,小分子干扰
• 泛素化

目的探讨Kip1泛素化促进复合体蛋白1(KPC1)对肝癌细胞系Bel-7402和SMMC-7721细胞增殖与迁移能力的影响以及可能的分子机制。方法通过慢病毒包装的方法将KPC1过表达重组质粒转染进肝癌细胞系Bel-7402和SMMC-7721,筛选得到稳定过表达KPC1的肝癌细胞系;采用小干扰RNA(siRNA)瞬转敲低肝癌细胞系中的KPC1;蛋白质免疫印迹法(WB)检测肝癌细胞系中KPC1蛋白的表达水平,验证过表达和敲低KPC1的效果;CCK-8法检测KPC1对肝癌细胞系增殖能力的影响;Transwell法验证KPC1对肝癌细胞系迁移能力的影响;WB法检测扰动KPC1后p105蛋白表达水平的影响;Log-rank检验比较KPC1高表达组和低表达组肝癌患者的生存期差异。结果过表达KPC1可显著抑制Bel-7402和SMMC-7721细胞的增殖和迁移能力;而敲低KPC1显著促进Bel-7402和SMMC-7721细胞的增殖和迁移能力。过表达KPC1抑制p105的表达水平、提升p50的表达水平;而敲低KPC1则促进p105的表达水平、抑制p50的表达水平。临床相关性分析显示KPC1在肝癌癌组织中下调表达,且与肝癌患者的不良预后显著相关。结论 KPC1通过抑制肝癌细胞系的增殖和迁移能力而发挥抑癌基因的功能。

• 单位
  蛋白质组学国家重点实验室