大鼠血小板衍生生长因子C重组腺病毒载体的构建及在内皮祖细胞中的表达

作者：李锋; 罗文军; 唐博; 陈以宽; 孙建明; 付健

来源：重庆医学, 2013, (16): 1837-1840.

• 血小板衍生生长因子C
• pAD/CMV/V5-DEST腺病毒载体
• 内皮祖细胞
• 转染 platelet-derived growth factor C
• pAD/CMV/V5-DEST vector
• endothelial progenitor cells
• transfection

目的构建含大鼠血小板衍生生长因子C(PDGF-C)基因的pAD-EGFP-PDGF-C的重组腺病毒表达载体,体外转染骨髓源性内皮祖细胞(EPCs)并观察目的基因蛋白及mRNA表达情况。方法通过逆转录聚合酶链式反应技术(RT-PCR)法从pIRES2-EGFP-PDGF-C真核表达载体中获得PDGF-C目的片段,经BP重组与LR重组插入到pAD/CMV/V5-DEST,构建pAD-PDGF-C-IRES2-EGFP腺病毒载体。酶切及DNA测序鉴定后转染HEK293A包装、纯化,测定病毒滴度后转染大鼠骨髓源性EPCs,应用Real-time qPCR、蛋白免疫印迹法(Western blottin...

• 单位
  重庆医科大学附属第二医院