荷花花蕾cDNA文库构建及质量评价

作者:吴璇; 张大生; 田代科; 张微微; **青; 刘凤栾; 陈青; 赵喜双; 吴少华
来源:亚热带植物科学, 2016, 45(01): 48-52.

摘要

为理解荷花Nelumbo nucifera花器官转录组表达情况,分别选取不同花型的代表品种‘洪湖红莲’Nelumbo nucifera‘Honghu Honglian’(单瓣)、‘唐招提寺莲’N.nucifera‘Tangzhaotisi Lian’(重瓣)和‘千瓣莲’N.nucifera‘Qianban Lian’(千瓣及全重瓣)的花蕾为材料分离mRNA,利用SMART技术合成双链cDNA,经限制性内切酶Sfi I酶切后回收去掉接头和500 bp以下片段的c DNA。将c DNA与p UC19载体连接,构建荷花花蕾cDNA文库。经检测,该文库容量为1.12×106 pfu·m L-1,插入片段大小集中在5002000 bp,重组率为95%。该文库的成功构建为荷花花蕾期转录组数据的开发及其花器官发育相关基因的功能研究奠定了分子基础。

  • 单位
    上海农林职业技术学院; 中国科学院; 上海辰山植物园; 福建农林大学