摘要
目的拟建立用放射性核素测量microRNA(即miRNA)在肿瘤细胞中表达的新方法,探讨miRNA与肿瘤的关系。方法分别克隆人钠/碘同向转运体(hNIS)及可与let-7互补结合的ras基因的3’非翻译区(3’-UTR),即RU序列;以hNIS作为报告基因,将raS基因的3’-UTR与hNIS连接构建融合基因(hNIS-RU),使hNIS的表达受let-7的调控;同时克隆前体let-7(pri-let-7)及前体mir143(pri-mirl43),转入细胞后加工形成成熟的let-7及mir143。将hNIS及hNIS-RU分别转染肺腺癌A549细胞,转染24 h后,于培养液中分别加入37 k...
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单位西京医院; 第四军医大学