膀胱移行细胞癌Uroplakin Ⅱ mRNA反义结合位点的筛选

作者：童强松; 陈方敏; 曾甫清; 郑丽端; 汪良

来源：中华实验外科杂志, 2005, (01): 16-18.

• 膀胱移行细胞癌
• UroplakinⅡ基因
• 反义寡核苷酸

目的　筛选膀胱移行细胞癌 (TCC)高表达基因UroplakinⅡ (UPⅡ )的反义结合位点(AAS)。方法　合成 2 0聚随机寡核苷酸文库 ,与全长UPⅡcRNA杂交 ,RNaseH酶切割后 ,经引物延伸、放射自显影、RNADraw软件分析 ,筛选UPⅡmRNA的AAS ,合成反义寡核苷酸 (AS ODN) ,转染RT4细胞株 18h后 ,RT PCR检测UPⅡmRNA水平。结果　筛选出 4个具有茎环结构的AAS (5 5 8～ 5 77bp、5 5 2～ 5 71bp、2 17～ 2 3 6bp、97～ 116bp) ,AS ODN对UPⅡmRNA的封闭效率分别为 2 9.3 % (P <0 .0 1)、82 .7% (P <0 .0 1)、71.3 % (P <0 .0 1)、70 .9% (P <0 .0 1)。结论　随机寡核苷酸文库 /RNaseH酶切割法能在体外筛选出UPⅡmRNA的AAS ,为研究UPⅡ生物学功能、TCC靶向生物治疗奠定了基础。

• 单位
  华中科技大学同济医学院附属协和医院