基于食管鳞癌奥沙利铂耐药细胞测序差异表达分析

作者：董慧玲; 刘祥辰; 孔鹏洲; 徐恩伟; 宋彬^*

来源：中国生物制品学杂志, 2022, 35(12): 1443-1457.

DOI：10.13200/j.cnki.cjb.003764

• 食管麟癌
• 奥沙利铂
• 耐药
• 全转录本测序
• 通路分析

目的 建立食管鳞癌（esophageal squamous cancer,ESCC）奥沙利铂（oxaliplatin,L-OHP）耐药细胞株，全转录本测序筛选与L-OHP耐药相关的基因，探索L-OHP耐药机制。方法 采用L-OHP大剂量冲击与逐步递增药物浓度的方法建立人ESCC L-OHP耐药细胞株KYSE150/L-OHP，采用CCK-8法鉴定耐药细胞株的耐药性；光学显微镜下观察耐药细胞的形态学改变；Transwell小室试验检测耐药细胞侵袭/迁移能力的变化；全转录本测序筛选KYSE150和KYSE150/L-OHP细胞差异表达基因，并对差异表达基因进行KEGG通路富集和RT-PCR验证。结果 L-OHP耐药细胞模型KYSE150/L-OHP的耐药指数为（4.0±1.35），明显高于亲本细胞（t=22.9,P <0.01）；光镜下KYSE150/L-OHP细胞体积增大，形态不规则；与亲本细胞株相比，KYSE150/L-OHP细胞的侵袭和迁移能力均显著增强（t分别为25.49和46.05,P均<0.000 1）；全转录本测序结果显示，P13K-Akt、MAPK、Hippo信号通路可能介导L-OHP耐药的发生过程；RT-PCR验证差异基因表达与测序结果一致。结论 成功建立了人ESCC L-OHP耐药细胞模型KYSE150/L-OHP，全转录本测序技术探讨了L-OHP化疗耐药的分子机制，为临床晚期ESCC L-OHP耐药患者的治疗提供了思路。

• 单位
  中山大学附属第五医院; 山西省肿瘤医院; 山西医科大学; 山西医科大学第一医院