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摘要
本试验旨在探究不同发酵条件对复合益生菌发酵饲料品质的影响。选用3株乳酸菌（鼠李糖乳杆菌、乳酸片球菌、干酪乳杆菌）、2株酵母菌（酿酒酵母菌、毕赤酵母菌），采用4因素（接种比例、接种量、水料比、温度）3水平正交设计对精补料发酵条件进行优化，共设9个组，测定各组发酵饲料中氨态氮（NH3-N）、可溶性糖（SS）、淀粉（ST）含量，pH以及3种霉菌毒素——黄曲霉毒素B1(AFB1)、玉米赤霉烯酮（ZEN）、呕吐毒素（DON）含量和微生物群落结构变化，用极差分析法确定综合指标最优时的发酵条件；将精补料在最优发酵条件下发酵不同时间（0、1、3、5、7、10、15 d），通过测定发酵饲料中常规营养成分含量、酶活性、霉菌毒素含量以及有氧稳定性，确定最佳发酵时间。结果表明：1)AFB1、ZEN含量优化组为G1（接种量5%，接种比例1∶1、温度20℃、水料比0.4∶1）、G7组（接种量15%，接种比例2∶1、温度20℃、水料比1∶1）,NH3-N含量优化组为G3（接种量5%，接种比例2∶1、温度30℃、水料比1∶1）、G7组，ST含量优化组为G6组（接种量10%，接种比例2∶1、温度30℃、水料比0.4∶1）,DON含量优化组为G5（接种量10%，接种比例1∶2、温度25℃、水料比1∶1）、G7组，SS含量优化组为G4（接种量10%，接种比例2∶1、温度20℃、水料比0.6∶1）、G6组。2)16S测序结果显示，G3组发酵饲料中微生物的α多样性和β多样性均显著高于G1、G2（接种量5%，接种比例1∶2、温度25℃、水料比0.6∶1）、G4、G6、G7、G8（接种量15%，接种比例1∶1、温度30℃、水料比0.4∶1）、G9组（接种量15%，接种比例1∶2、温度25℃、水料比0.6∶1）(P<0.05)，略高于G5组（P>0.05）;G3组中植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）、短乳杆菌（Lactobacillus brevis）的相对丰度显著高于G1、G2、G4、G5、G6、G8、G9组（P<0.05），与G7组差异不显著（P>0.05）。3）与发酵第0天（未发酵）时相比，发酵饲料粗蛋白质（CP）含量、纤维素酶（CL）、脂肪酶（LPS）、酸性蛋白酶（ACP）活性均在发酵第5天时显著升高（P<0.05）,NH3-N、中性洗涤纤维（NDF）、酸性洗涤纤维（ADF）含量均在发酵第5天时显著降低（P<0.05）,β-淀粉酶（β-AL）活性、pH以及SS、ST、AFB1、ZEN、DON含量均在发酵第10天时显著降低（P<0.05）。4）发酵饲料有氧暴露20 d后，其中心温度高出环境温度2℃，同时pH异常增大。结论：1）精补料最优发酵条件为接种量5%，接种比例2∶1、温度30℃、水料比1∶1，该发酵条件能够有效提高发酵饲料中微生物的多样性，提高Lactobacillus brevis的相对丰度。2）精补料最佳发酵时间为5 d，该发酵时间可提高发酵饲料的营养成分含量，降低霉菌毒素含量。3）发酵结束开盖后，发酵饲料应在20 d内喂完。
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