适合早期诊断的非洲猪瘟sIgA抗体量子点免疫层析检测方法建立

作者：谢青云; 易玮婕; 李嘉豪; 白昀; 谢星; 袁厅; 张越; 冯余凡; 赵东明; 步志高; 刘斐^*; 冯志新^*

来源：畜牧兽医学报, 2023, 54(10): 4311-4319.

• 非洲猪瘟
• sIgA抗体
• 量子点免疫试纸条
• 现场即时检验

非洲猪瘟(African swine fever, ASF)是由非洲猪瘟病毒感染引起的一种烈性猪传染病，其极高的传染性和发病率给养猪产业造成了巨大的经济损失。目前尚无安全有效的ASF疫苗，因此早期监测是防控ASF最重要的解决方案之一。建立敏感、快速的ASF现场即时检验方法，对维护生猪产业繁荣具有重要意义。首先基于氨基和羧基的偶联反应制备量子点微球(quantum dot microsphere, QDM)偶联ASFV重组抗原蛋白p30的检测探针和QDM-兔抗鸡IgY质控探针；接着在检测线和质控线分别固定鼠抗猪IgA-Sc片段抗体和鸡IgY蛋白制备侧向流免疫试纸条；待检动物口腔液中的ASF sIgA抗体经QDM-p30捕获可被固定至T线。将ASFV阳性口腔液以2倍梯度稀释，检测该方法的灵敏度。通过检测其他几种常见猪病病毒验证该方法的特异性。通过检测ASFV阴性和阳性动物的口腔液临床样本评价该方法的临床诊断效能。该方法特异性好，与PRV、CSFV、PRRV不存在交叉反应；灵敏度高，最低检出稀释度可达1∶64;耗时短，可在20 min内完成检测；操作便捷，无需侵入式采样；检出时间早，人工感染最早可于感染后第6天检出。本研究开发了一种口腔液中ASF sIgA抗体的现场即时检验(point-of-care testing, POCT)量子点免疫试纸条，为ASFV的监测和防控提供了新的技术支持和补充。

• 单位
  兽医生物技术国家重点实验室; 江苏省农业科学院; 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所