US3/US7/US8/UL23/UL50基因缺失重组伪狂犬病病毒的构建及对犬致病性分析

作者：潘玉迪; 李茵; 缪茜; 吴菱; 冯力^*; 田进^*

来源：中国兽医学报, 2022, 42(08): 1577-1584.

DOI：10.16303/j.cnki.1005-4545.2022.08.08

• 伪狂犬病病毒
• US3/US7/US8/UL23/US3/UL50基因缺失
• CRISPR/Csa9

自2011年以来，伪狂犬病(PR)在我国猪群中暴发，为控制PR的传播，基于流行的变异株研制了US7/US8/UL23缺失重组伪狂犬病病毒(rPRV)疫苗。疫苗可以对猪提供有效的免疫保护，但由于食用被污染的生肉或免疫猪的内脏，毛皮动物如犬、狐狸、水貂等越来越多地受到PRV弱毒疫苗株的感染，该感染对于毛皮动物是致死性的。本研究以rPRVdelUS7/US8/UL23为基础，利用CRISPR/Cas9介导的同源重组技术构建rPRVdelUS7/US8/UL23/US3/UL50;比较了rPRVdelUS7/US8/UL23(三缺失)和rPRVdelUS7/US8/UL23/US3/UL50(五缺失)的体外生长动力学和对犬致病性。结果显示，重组病毒rPRVdelUS7/US8/UL23/US3/UL50在感染后24～48 h的生长动力学低于rPRVdelUS7/US8/UL23。此外，rPRVdelUS7/US8/UL23感染细胞可产生细胞融合现象，而rPRVdel US7/US8/UL23/US3/UL50感染细胞未形成细胞融合。US7/US8/UL23缺失rPRV攻毒的犬表现出明显的神经症状，所有犬均死亡，但用US7/US8/UL23/US3/UL50缺失rPRV攻毒的犬未表现出任何神经症状，所有犬在试验期间均存活。组织病毒载量分析并未显示出明显差异。本研究结果表明，US7/US8/UL23/US3/UL50缺失的rPRV对犬无致病力，同时也凸显了US3、UL50基因在PRV感染犬等毛皮动物呈现高毒力中的作用，为研发更安全的疫苗提供了策略。

• 单位
  中国农业科学院哈尔滨兽医研究所; 兽医生物技术国家重点实验室