耳聋左慈丸对H2O2损伤小鼠耳蜗基底膜miR-34a的作用及机制

作者：楚敏; 阎希芮; 龚永昌; 刘晴; 施建蓉; 董杨^*

来源：中国药理学通报, 2021, 37(12): 1757-1762.

• 耳聋左慈丸
• 老年性聋
• miR-34a
• SIRT1
• LC3-Ⅱ
• p62
• 自噬
• 凋亡

目的 探讨耳聋左慈丸对H2O2致小鼠耳蜗基底膜损伤模型miR-34a的作用及其机制。方法 采用C57BL/6J小鼠耳蜗基底膜的离体培养，实验分为对照组、H2O2模型组(0.3 mmol·L-1)、耳聋左慈丸组(5 mg·L-1、10 mg·L-1和50 mg·L-1)。q-RTPCR检测miR-34a表达，免疫荧光法检测沉默信息调节因子1(silent information regulator 1,SIRT1)、微管相关轻链蛋白3(microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC3)和选择性自噬接头蛋白(p62/sequestosome 1,SQSTM1)在耳蜗基底膜毛细胞的表达；TUNEL法检测基底膜毛细胞的凋亡情况。结果 与对照组相比，模型组小鼠耳蜗基底膜miR-34a表达明显升高(P<0.01),耳聋左慈丸组miR-34a表达下降(P<0.01);模型组小鼠耳蜗基底膜毛细胞SIRT1蛋白表达与对照组相比明显降低(P<0.01),LC3-Ⅱ和p62蛋白表达明显增加(P<0.05,P<0.01),TUNEL阳性细胞数增多；与模型组比较，耳聋左慈丸组SIRT1表达升高(P<0.05),LC3-Ⅱ和p62蛋白表达降低(P<0.01,P<0.05),TUNEL阳性细胞数减少。结论 耳聋左慈丸可能通过作用于miR-34a,调节SIRT1蛋白，进而影响耳蜗毛细胞的自噬和凋亡，达到抑制H2O2致毛细胞氧化损伤的作用。

• 单位
  基础医学院; 上海中医药大学