米曲霉产米黑根毛霉脂肪酶高通量筛选方法的建立

作者:熊志岳; 许逗; 郭元昕; 田锡炜*; 储炬*
来源:华东理工大学学报, 2022, 48(04): 519-525.
DOI:10.14135/j.cnki.1006-3080.20210415002

摘要

为了快速、高效地筛选出高产米黑根毛霉脂肪酶(RML)的米曲霉菌株,利用常温常压等离子体诱变技术(ARTP)对米曲霉孢子进行诱变,优化了高通量检测RML酶活的双指示剂法,建立了24孔板米曲霉高通量培养体系。通过对诱变后的1 200孔(36 000~48 000个孢子)进行高通量筛选,最终筛选出4株米曲霉高产突变株。经由摇瓶验证,突变株Ⅰ7-D6-7、Ⅱ4-4B-5、Ⅲ3-5C-1、Ⅴ7-6C-3酶活分别达到了265.98、240.90、253.52、293.50 U/mL,比出发菌株的酶活(176.52 U/mL)分别提高了50.68%、36.47%、43.61%、66.27%。

全文