一测多评法测定水蛭中尿嘧啶、次黄嘌呤、黄嘌呤和尿苷的含量

作者：周绪云

来源：中国药品标准, 2019, 20(04): 339-345.

DOI：10.19778/j.chp.2019.04.010

• 一测多评法
• 水蛭
• 尿嘧啶
• 次黄嘌呤
• 黄嘌呤
• 尿苷
• 相对校正因子
• 外标法
• 含量测定

目的:建立同时测定水蛭药材中尿嘧啶、次黄嘌呤、黄嘌呤和尿苷4个成分含量的方法。方法:采用高效液相色谱法,色谱柱为ZORBAX SB-C18(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-10 mmol·L-1磷酸二氢钾溶液(梯度洗脱),流速为1.0 mL·min-1,检测波长为254 nm,柱温为30℃,进样量为10μL。以次黄嘌呤为内参物,计算其对尿嘧啶、黄嘌呤和尿苷的相对校正因子(RCF),通过RCF计算上述3个成分的含量;以外标法测定的含量作实测值,比较计算值与实测值的差异。结果:尿嘧啶、次黄嘌呤、黄嘌呤和尿苷检测质量浓度线性范围分别为1.60～32.00、4.05～81.00、1.50～30.00、1.25～25.00μg·mL-1(r>0.999);精密度、稳定性、重复性试验的RSD<2.0%;平均加样回收率(n=6)分别为95.05%～99.45%(RSD=1.73%、95.89%～99.38%(RSD=1.52%、94.00%～97.88%(RSD=1.74%、96.07%～99.35%(RSD=1.18%)。计算值与实测值差异无统计学意义(P>0.05)。结论:该方法操作简便,精密度、稳定性、重复性良好,可用于水蛭药材中尿嘧啶、次黄嘌呤、黄嘌呤和尿苷4个成分含量的同时测定。