C反应蛋白真核表达质粒的构建、表达及其对小鼠血管平滑肌细胞TNF-α表达的影响

作者：李茂荣; 刘正湘

来源：中国组织化学与细胞化学杂志, 2011, (01): 11-16.

• 小鼠肝细胞
• 小鼠血管平滑肌细胞
• C-反应蛋白
• TNF-α
• 基因表达 Mouse liver cell
• Mouse aortic smooth muscle cell
• C-reactive protein
• TNF-α

目的构建小鼠C-反应蛋白基因重组质粒pIRES-CRP,观测其对血管平滑肌细胞TNF-α表达的影响。方法用RT-PCR法,以小鼠肝组织RNA为模板,扩增获得编码C-反应蛋白(C-reactive protein,CRP)的全长基因。将CRP基因克隆入真核表达质粒pIRES中,构建重组真核表达质粒pIRES-CRP。将重组质粒转染HeLa细胞,通过RT-PCR法检测CRPmRNA的表达,Western blot检测CRP蛋白的表达。将阳性质粒转染小鼠血管平滑肌细胞,通过Western blot检测CRP对TNF-α表达的影响。结果经酶切鉴定、PCR和测序分析结果表明,所克隆的CRP基因与报道结果...

• 单位
  北京航天总医院; 华中科技大学同济医学院附属同济医院