大花红景天介导PI3K/AKT-HDAC2轴对人胚肺成纤维二倍体细胞衰老的调控作用

作者：许志连; 杨惠卿; 洪顺福; 阮菲

来源：中国现代应用药学, 2023, 40(18): 2512-2518.

DOI：10.13748/j.cnki.issn1007-7693.20230850

• 细胞衰老
• 大花红景天
• 衰老相关β-半乳糖苷酶
• 组蛋白去乙酰化酶2
• PI3K/AKT

目的 探究大花红景天中杞柳苷(salipurposide,Sali)、红景天苷(salidroside,Sal)、异柳糖苷(isotachioside,Isota)对人胚肺成纤维二倍体细胞(2BS)衰老调控作用及可能机制。方法 显微镜下观察并选取年轻28代龄2BS(28PD)细胞和衰老50代龄2BS(50PD)细胞。MTT试验测定1.25,2.5,5.0,7.5,10.0μmol·L–1 Sal,2.5,5.0,7.5,10.0,12.5μmol·L–1Sali以及Isota对50PD细胞活性的影响。根据MTT结果，5.0μmol·L–1 Sal和10.0μmol·L–1 Sali、Isota用于进行后续实验。28PD和50PD细胞分为28PD组、50PD组、50PD+Sali组、50PD+Sal组、50PD+Isota组，各组相应药物干预24 h。测定细胞衰老相关β-半乳糖苷酶(senescence associated-beta-galactosidae,SA-β-gal)表达情况，细胞丙二醛(malondialdehyde,MDA)、活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量以及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化酶(glutathione peroxidase,GSH-PX)活性情况，实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法分别测定细胞磷脂酰肌醇三羟基激酶(phosphatidylinositol-3-kinase,PI3K)、蛋白激酶B(AKT)、组蛋白去乙酰化酶2(histone deacetylase 2,HDAC2)的mRNA表达以及PI3K、磷酸AKT(p-AKT)、HDAC2蛋白表达情况。结果 与28PD组比较，50PD组细胞SA-β-gal表达增加，MDA、ROS含量增加，SOD、GSH-PX活性降低，PI3K、AKT、HDAC2的mRNA以及相应蛋白表达降低(P<0.01)。50PD细胞经Sali、Sal、Isota干预后，SA-β-gal表达显著降低(P<0.01),MDA、ROS含量显著降低(P<0.01),SOD、GSH-PX活性显著提高(P<0.01),PI3K、AKT、HDAC2的mRNA以及相应蛋白表达均显著增加(P<0.05或P<0.01)。结论 大花红景天中Sali、Sal、Isota能降低50PD细胞SA-β-gal表达，其作用可能与抑制氧化应激、调控PI3K/AKT-HDAC2轴表达有关。

• 单位
  浙江中医药大学; 杭州市中医院