稳定表达BCR/ABL的小鼠BaF3-P210细胞株的建立及其生物学特性的研究

作者：史梦; 冯文莉; 张文萍; 王小中; 黄世锋; 曾建明; 温健萍; 陶昆; 陈新敏; 曹唯希; 黄宗干

来源：第三军医大学学报, 2008, (19): 1791-1794.

DOI：10.16016/j.1000-5404.2008.19.023

• 慢性粒细胞白血病
• bcr/abl融合基因
• 逆转录病毒载体
• BaF3细胞

目的构建能稳定表达BCR/ABL的小鼠转化细胞株BaF3-P210,并初步探讨BCR/ABL对BaF3细胞生物学特性的影响。方法将含有bcr/abl基因的逆转录病毒载体转染到包装细胞,收集病毒感染BaF3细胞,经筛选和亚克隆,获得稳定表达BCR/ABL的转基因BaF3-P210细胞。用PCR、DNA测序、RT-PCR和Westernblot检测bcr/abl基因在靶细胞中的整合和表达;用台盼蓝细胞计数法、流式细胞仪(FCM)和MTT法研究BCR/ABL对BaF3细胞生物学特性的影响。结果bcr/abl基因整合在BaF3细胞基因组中,BaF3-P210细胞能稳定表达bcr/abl基因及其蛋白。与对照组相比,BaF3-P210细胞增殖速度增快(P<0.05);G0/G1期细胞比例下降,S期和G2/M期细胞比例增高(P<0.05);经STI571处理后的细胞增殖抑制率为(54.08±1.90)%(P<0.05),早期凋亡率为(12.35±2.04)%(P<0.05)。结论成功构建的能稳定表达BCR/ABL的小鼠BaF3-P210转化细胞株具有增殖能力增强、细胞周期进程加速和对STI571敏感的恶性表型特征。

• 单位
  重庆医科大学; 重庆医科大学附属第一医院