miR-422a靶向激肽释放酶-4抑制宫颈癌细胞的增殖、迁移与侵袭

作者：宋鹏霞; 李群锋; 曹焰晖; 姚水洪^*

来源：天津医药, 2021, 49(10): 1031-1037.

• 宫颈肿瘤
• 激肽释放酶类
• 微RNAs
• HeLa细胞
• 细胞增殖
• 细胞运动
• 细胞侵袭
• miR-422a

目的探讨miR-422a靶向激肽释放酶-4(KLK4)对宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法实时荧光定量PCR法(qPCR)检测人宫颈癌细胞HeLa、SiHa和人正常宫颈上皮细胞H8中miR-422a的表达;将宫颈癌HeLa细胞分为blank组、miR-NC组、miR-422a组、mut miR-422a组、miR-422a+pcDNA组、miR-422a+pcDNA-KLK4组。CCK-8实验和Transwell实验检测各组宫颈癌HeLa细胞增殖、迁移和侵袭的能力;TargetScan软件预测miR-422a可能调控结合的靶基因,双荧光素酶活性实验对靶向关系进行验证。Western blot检测各组细胞KLK4蛋白表达水平。结果与人正常宫颈上皮细胞H8相比,宫颈癌HeLa、SiHa细胞中miR-422a呈现低表达(P<0.01),选择宫颈癌HeLa细胞进行后续实验;与miR-NC组和blank组相比,miR-422a组培养4、6 d细胞增殖能力降低,培养6、12 h细胞迁移和侵袭数量减少(P<0.05);与miR-422a+pcDNA组相比,miR-422a+pcDNA-KLK4组培养4、6 d细胞增殖能力明显升高,培养6、12 h细胞迁移和侵袭数量增加(P<0.01)。TargetScan软件预测发现KLK4基因与miR-422a存在结合位点,并经双荧光素酶报告基因实验验证。与miR-NC组相比,miR-422a组中KLK4蛋白的表达水平降低,与miR-422a组相比,mut miR-422a组中KLK4蛋白的表达水平升高(P<0.01),与miR-422a+pcDNA组相比,miR-422a+pcDNA-KLK4组中KLK4蛋白的表达水平升高(P<0.01)。结论 miR-422a可通过靶向KLK4蛋白的表达抑制宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭。

• 单位
  衢州职业技术学院