新型冠状病毒核衣壳蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

作者：肖琦; 何后军; 江宁; 曾川; 顾俊; 田梦婷; 王培霞; 于晓梦; 黄冬艳; 甘平; 唐玉新; 叶昱^*

来源：江西农业大学学报, 2021, 43(03): 660-664+674.

DOI：10.13836/j.jjau.2021072

• 新型冠状病毒
• 单克隆抗体
• 核衣壳蛋白

【目的】当前,新型冠状病毒(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)导致的疫情在全球大流行,严重危害人类的生命健康。研究拟制备并鉴定针对SARS-CoV-2核衣壳蛋白(nucleocapsid,N)的单克隆抗体,为SARS-CoV-2新型快速检测方法的创制奠定基础。【方法】纯化原核表达的SARS-CoV-2 N重组蛋白并免疫BALB/c小鼠,经过4次免疫后将小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,采用ELISA方法筛选阳性杂交瘤细胞,并通过western blot和间接免疫荧光试验鉴定抗体的反应性。【结果】经3次亚克隆,试验获得了2株能够稳定分泌抗原特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为2D11和8G6;并且制备的抗体与真核表达的SARS-CoV-2 N蛋白反应原性良好。【结论】研究制备的单克隆抗体能够用于SARS-CoV-2的检测。

• 单位
  江西农业大学; 江西省动物疫病预防控制中心