臭牡丹调控脊髓N-甲基-D-天冬氨酸受体亚基缓解神经病理性疼痛

作者：温婷; 虞子宁; 鞠艺楠; 黄成炬; 王安琪; 黄诚; 胡志苹^*

来源：赣南医学院学报, 2023, 43(09): 877-884.

• 神经病理性疼痛
• 臭牡丹
• N-甲基-D-天冬氨酸
• 周围神经损伤
• 大鼠

目的：探讨臭牡丹（Clerodendrum bungei Steud., CBS）的镇痛作用是否与N-甲基-D-天冬氨酸（N-methyl-Daspartate,NMDA）受体相关。方法：雄性成年SD大鼠24只，随机分为假手术组（Sham组）、坐骨神经分支选择性损伤（Spared nerve injury,SNI）模型组（SNI组）和30 g·kg-1 CBS治疗组（SNI+CBS组）。SNI+CBS组于SNI术后第7 d灌胃给予CBS，持续21 d,Sham组和SNI组给予同等体积的生理盐水灌胃。于术后第26～28 d检测大鼠步态；第28 d取脊髓，qPCR方法检测NMDA受体亚基GluNR1、GluN2A、GluN2B和GluN3A mRNA表达，Western blot和免疫荧光方法检测GluN2A和GluN2B蛋白水平，分子对接方法模拟CBS中主要成分与GluN2B的亲和力。结果：与Sham组相比，SNI模型组大鼠患肢的站立时间、最大接触时的最大强度、足印长度、足印宽度和爪印面积降低，最大接触时间百分比升高，脊髓GluN2A、GluN2B和GluN3A mRNA表达降低，GluN2A和GluN2B蛋白水平升高。与SNI组相比，SNI+CBS组大鼠患肢的站立时间、最大接触时的最大强度、足印长度和足印宽度升高，最大接触时间百分比降低，脊髓GluN2A、GluN2B和GluN3A mRNA表达升高，GluN2A和GluN2B蛋白水平降低。各组GluNR1 mRNA表达差异无统计学意义（P>0.05）。分子对接实验结果显示，原始配体Ro25-6981与GluN2B对接的结合自由能（△G）为-11.72 KJ·mol-1，估计抑制常数（Ki）为2.58 nmol;CBS主要成分α-香树脂醇、赪桐酮和木栓酮与GluN2B对接的△G及Ki与Ro25-6981接近，甚至优于Ro25-6981；从对接构象上看，Ro25-6981与木栓酮占据了GluN1B结合位点，α-香树脂醇和赪桐酮则占据了GluN2B结合位点，呈现出较强的NMDA受体抑制作用。结论：CBS对SNI模型所致神经病理性疼痛具有缓解作用，其机制可能是通过抑制NMDA受体来实现。

• 单位
  赣南医学院; 基础医学院; 赣南医学院第一附属医院