携带TRAIL基因慢病毒载体的构建及其体外感染淋巴瘤细胞效率

作者：付晓瑞; 张旭东; 张辰; 赵璐; 汪变红; 张明智

来源：中国实验血液学杂志, 2012, (04): 900-905.

• 人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体
• 慢病毒载体
• 淋巴瘤 TNF-related apoptosis-inducing ligand
• lentiviral vector
• lymphoma

本研究目的构建携带人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)基因的慢病毒载体,并研究其对不同细胞系的淋巴瘤细胞的感染效率。采用分子克隆技术,将针对TRAIL基因mRNA的cDNA片段插入到克隆载体pGM-T,构建pGM-T-TRAIL,然后将测序正确的TRAIL基因克隆至慢病毒表达载体pWPI,构建慢病毒表达载体pWPI-TRAIL。最后利用pWPI/VSV-G/Δ8.2慢病毒包装系统,通过转染293T细胞,制备重组慢病毒plenti-TRAIL,并进行浓缩和滴度测定。将重组慢病毒载体感染不同来源的淋巴瘤细胞系,测定荧光表达评价感染效率,利用RT-PCR和Western blot法评价TRA...

• 单位
  郑州大学第一附属医院