摘要

【目的】筛选对柑橘绿霉病菌指状青霉(Penicillium digitatum)具有拮抗作用的海洋源微生物,以期为柑橘绿霉病的生物防治提供新的菌种资源。【方法】采用平板稀释涂布法,从广东湛江海域的5个海底淤泥样品中分离微生物;以指状青霉为指示菌,利用平板对峙法对分离的海洋微生物进行初筛,管碟法进行复筛。对复筛获得的菌株HY 2-1进行形态学观察、生理生化检测、16S rDNA序列分析及分类学鉴定,并测定该菌对不同盐浓度的耐受性。通过紫外照射、热、酸碱及酶等手段处理无菌发酵上清液(CFS),初步探究菌株HY 2-1所产活性物质的稳定性。【结果】筛选出一株对指状青霉有较好拮抗作用的细菌,其抑菌圈直径达到(21.88±0.19)mm,该菌鉴定为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)。培养基盐质量浓度在20 g/L范围内对菌株HY2-1生长具有促进作用,且该菌对盐的耐受性高达130 g/L。菌株HY 2-1的CFS在短时间紫外照射下稳定性较好,60℃以内热稳定性较好,在pH值3~9的范围内抑菌活性稳定,但经胃蛋白酶、胰蛋白酶、蛋白酶K等酶处理后,抑菌活性显著降低(P<0.05)。【结论】来源于广东省湛江市北部湾海域的解淀粉芽孢杆菌HY 2-1(B. amyloliquefaciens HY 2-1),具有耐受高盐的特性,且其发酵上清液抑菌活性物质的稳定性较好,可为柑橘采后病害生防制剂的开发奠定基础。

全文