NS1蛋白点突变对猪流感病毒感染细胞的影响

作者:刘雷; 程靖华; 石迎; 陶洁; 李本强; 刘惠莉*
来源:上海农业学报, 2020, 36(06): 60-65.
DOI:10.15955/j.issn1000-3924.2020.06.12

摘要

以H1N1亚型猪流感病毒A∕swine∕Shanghai∕3∕2014为模板,选择核定位序列(Nuclear localization sequence,NLS1)与核输出序列(Nuclear export sequence,NES)区域中5个保守关键氨基酸突变为丙氨酸,构建真核表达载体,分析NLS1和NES区域中影响NS1蛋白定位及细胞因子水平的氨基酸位点。结果表明:NS1L36A、NS1L141A、NS1L146A与野生型NS1蛋白相似,转染后在细胞质和细胞核中均可检测到蛋白表达。NS1R38A有少量进入细胞核,而NS1L144A蛋白主要分布在细胞质中,不进核。NS1R38A和NS1L144A表达载体转染细胞,细胞内Ⅰ型干扰素β(IFN-β)和抗病毒蛋白(OAS-1)水平升高,与野生型NS1蛋白比较差异显著。因此,NS1蛋白中第38位和第144位氨基酸的突变可以减轻其对宿主细胞抗病毒免疫应答的抑制,但这两个突变蛋白在细胞中定位和分布不同显示其作用机制可能不同。