利用噬菌体展示技术构建Mhp168株Hsp70随机肽库

作者:贾球锋; 毛晓娜; 李丽芳; 张映
来源:生物技术, 2020, 30(03): 226-218.
DOI:10.16519/j.cnki.1004-311x.2020.03.0037

摘要

[目的]构建Mhp168株Hsp70 C端基因的噬菌体展示随机肽库。[方法]扩增猪肺炎支原体168株热休克蛋白Hsp70 C端1 803 bp的DNA序列。回收Hsp70 DNaseⅠ消化产物中80~150 bp的DNA片段与p C89载体连接。辅助噬菌体超感染转化重组噬粒的E.coli XL1-Blue细胞。检测肽库的多样性,测定库容。[结果]在噬菌体表面展示出Hsp70 C端基因的随机片段融合蛋白。随机肽库库容约为9.9×103,滴度约为1.5×1013PFU/ml。[结论]所构建的随机肽库可以满足Hsp70构象型抗原表位筛选。

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