结核分枝杆菌ESXB-ESXA融合蛋白的表达及其作为检测抗原的初步应用

作者：赵海; 朱虹; 宋立华; 何君; 檀华; 端青

来源：生物技术通讯, 2010, (04): 501-504.

• 结核病
• 结核分枝杆菌
• ESXB
• ESXA
• 融合表达 tuberculosis
• Mycobacterium tuberculosis
• ESXB
• ESXA
• fusion expression

目的:探索一种大量表达结核分枝杆菌ESXB-ESXA融合蛋白的方法,分析其抗原性,评价其在结核抗体检测中的初步应用。方法:采用PCR方法从结核分枝杆菌基因组中分别扩增esxB和esxA基因,用Linker(G4S)3连接2条目的片段,连接pET-32a(+)载体,构建ESXB-ESXA融合蛋白表达载体;重组表达载体转化宿主细胞大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达、纯化,Western印迹分析重组蛋白的抗原性;建立以融合重组蛋白为抗原的ELISA和胶体金检测方法,分析其在结核病抗体检测中的应用。结果:构建了ESXB-ESXA融合蛋白的表达载体,重组ESXB-ESXA在大肠杆菌中得以高效表...

• 单位
  病原微生物生物安全国家重点实验室; 军事医学科学院