丙型肝炎病毒非结构蛋白NS5A反式激活基因NS5ATP7的克隆

作者：**刘妍成军王琳邵清梁耀东刘敏

来源：世界华人消化杂志, 2004, (01): 88-91.

• NS5ATP7
• 反式激活
• 非结构蛋白
• 基因差异表达
• 丙型肝炎病毒
• 表达质粒
• 转染
• 基因片段
• 注册号
• 开放读码框架

目的:应用抑制性消减杂交(SSH)技术及生物信息学技术筛选并克隆丙型肝炎病毒(HCV)非结构蛋白5A(NS5A)反式激活新型靶基因. 方法:以HCV NS5A表达质粒pcDNA3.1(-)-NS5A转染HepG2细胞,以空载体pcDNA3.1(-)为平行对照,提取mRNA并进行SSH分析.对于所获基因片段序列分析表明, 其中之一为新型基因片段,与GenBank中注册的已知功能基因序列没有同源陛,利用表达序列标签(EST)序列的搜索和比对,进行电子拼接,根据基因起始密码子的Kozak规则和终止密码子下游保守的多聚腺苷酸信号序列,确定新型基因序列.从HepG2细胞提取总RNA,以逆转录多聚酶链反应...

• 单位
  解放军第302医院