LRIG3基因特异性siRNA腺病毒表达载体的构建与鉴定

作者：袁晓奕; 包世新; 杨为民; 叶章群

来源：华中科技大学学报(医学版), 2010, (01): 18-21.

• LRIG3基因
• RNA干扰
• 腺病毒载体
• 膀胱癌 LRIG3 gene
• RNA interference
• adenovirus vector
• bladder carcinoma

目的构建并鉴定针对LRIG3基因的小干扰RNA(LRIG3-siRNA)腺病毒表达载体,为膀胱癌基因治疗的研究提供有效的实验工具。方法设计可形成小发夹结构的LRIG3-siRNA模板cDNA序列,克隆至缺陷型腺病毒质粒pSilencer-U6neo,构建LRIG3-siRNA表达质粒pSilencer-LRIG3。鉴定正确后,将pSilencer-LRIG3转染至HEK293细胞,包装成复制缺陷型腺病毒pAd-LRIG3。大量扩增pAd-LRIG3,氯化铯梯度离心纯化,测病毒滴度。pAd-LRIG3感染人膀胱癌细胞T24,RT-PCR法检测LRIG3 mRNA的表达。结果酶切分析、测序鉴定表明...

• 单位
  华中科技大学同济医学院附属同济医院